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艾滋病检测

2015年10月14日

获得性免疫缺陷综合征 hiv 实验室技术和方法 艾滋病(aids)又称获得性免疫缺陷综合征,是由人类免疫缺陷病毒(hiv)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。hiv感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分,建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查,控制艾滋病的流行显得尤为重要。以下本文就hiv的检测技术现状及进展做一综述。

艾滋病检测

1 hiv的感染机制及感染标志

hiv病毒侵入人体后,其表面糖蛋白gp120与细胞表面受体蛋白cd4以高亲和力结合,吸附到宿主细胞上;gp120再与宿主细胞表面辅助受体相互作用,使病毒与宿主细胞膜更接近;gp41产生一系列构象变化,其n端的融合肽片段插入宿主细胞膜,导致病毒包膜与细胞膜的最终融合,病毒rna进入细胞。在hiv感染后,最先能够监测到病毒rna、然后是p24抗原,最后是抗体。

在感染后的10~14 d内,病毒rna水平是呈指数上升,随后下降并保持在持续稳定的水平上,进入hiv无症状期。p24抗原水平随着病毒rna水平的发展而发展,在急性感染期就可以出现,被认为是病毒复制的间接标志,但由于检测方法的灵敏度不够而使得其检出时间要比rna晚。从hiv感染到能够检测出hiv抗体这一时期,被称作“窗口期”。在窗口期,能够通过病毒rna、p24抗原和cd4淋巴细胞水平来确定hiv感染。cd4淋巴细胞水平随着感染的发展而逐渐下降,当其在血液中细胞下降到200个/ml时,就会发生严重的免疫缺陷,患者就被确诊为艾滋病。病毒rna、p24抗原、hiv抗体和cd4淋巴细胞水平可以用来确定hiv感染、检测病情发展。

hiv在病毒分类中属逆转录病毒科慢病毒属中的人类免疫缺陷病毒组。迄今为止,根据血清学反应和病毒核酸序列测定,全球流行的hiv可分为2型:hiv?1型和hiv?2型。在hiv?1型内,根据编码包膜蛋白的env基因和编码壳蛋白的gag基因序列的同源性又进一步分为3个组:m组(主要组)、o组(外围组)和n组(新组或非m非o组),m组内又可分为a?j10个亚型。在hiv?1型和hiv?2型之间,其核苷酸序列有45%的同源性,并且存在免疫交叉反应。应用免疫印迹法(west blot)可以将二者明确地区别开来。

2 hiv感染的主要检测方法

目前检测hiv的方法有100多种,总体来说可以分为抗体检测和病毒检测两大类。病毒检测包括细胞培养(病毒分离)、p24抗原检测和病毒核酸检测。早期对hiv的诊断主要是通过血清学试验检测抗hiv的抗体,间接地诊断hiv感染。近几年,分子生物学方法不断被应用到hiv的检测中,hiv的实验室诊断方法取得了很大的进展,核酸检测已经成为了hiv实验室诊断的发展方向。 

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